Ну вот. Наконец, наступил тот ответственный момент, когда пришло время озадачиться особенностями внутренней жизни собаки. А именно – определением того самого святого момента, когда зарождается жизнь. Исходно планировалось произвести всё это простым и доступным для жителей мегаполиса способом – сдавать кровь на гормоны. Так и договаривались в своё время в ветеринарной академии. Но, началось всё с того, что хитрая бестия сбила абсолютно все планы, сорвав сроки запуска процесса. Результат не замедлил сказаться. Первое, по чему это ударило – это результаты выставки и Чемпионата. Но, главное, что окончательно разрушило все задумки – врач, проводящая все эти анализы, оказалась в отпуске. Можно, конечно, было в её отсутствие осуществить забор крови, с последующим центрифугированием и замораживанием плазмы, с тем, чтобы оставить все пробы до её возвращения. Но сдавать кровь вначале надо раз в два-три дня, а на пике – ежедневно. У нас у самих начинался отпуск. Короче, обломила Белка все благие намерения. И ничего не оставалось, как заняться самостоятельными научными изысканиями.
Итак, начну в подробностях. Пункт первый – необходимо поймать самоё начало. Чтобы знать точку отсчёта. Из опыта общения с питерскими ньюфистами уяснила два способа. Одни делают это путём внешнего визуального исследования петли. Происходит это так: собака заваливается на спину, слегка раздвигаются кожные складочки петли и смотрится – появились кровянистые выделения или нет? Второй способ: собака стоит, а ты ватной палочкой или, что лучше, просто пальчиком, обмотанным ватным диском или бинтом, проникаешь ВНУТРЬ петли, и изучаешь последствия при хорошем освещении. Глубоко лезть не надо, если пальцем, то на одну фалангу указательного или чуток поболее. И немного пройтись ВНУТРИ по стеночкам. Этот вариант лучше, т.к. больше площадь соприкосновения, т.е. больше шансов «поймать». И тот и другой способ надо применять непременно с утра и до того момента, как вы выводите собаку на «попис». Иначе все эти незначительные следы будут смыты могучим потоком, и вы пропустите первый день. Я сначала пользовалась палочками, потом перешла на диски. Поскольку Белка «задвинула» это дело практически на месяц, то и кувыркалась я долго. Сначала палочки демонстрировали мне только лёгкую желтизну вполне понятного происхождения, то ж делали и диски, когда я на них перешла. Потом стала появляться непонятная лёгкая «пачкотня» буроватого цвета (три-четыре дня), и я в недоумении («оно» или не «оно») стала складывать эти диски в пакетик, с целью показать знающим людям.
Но не успела. Так как в один прекрасный момент, а именно 04.08.08 – на следующий после выставки и на неделю предшествующий Чемпионату день, – я увидела откровенное кровяное пятнышко точно по следу моего пальца. Его я, к сожалению, выбросила, поэтому фотки нет. Но в утешение могу сказать – вы сразу поймёте, что это «оно», так же, как поняла это я. Оно слишком явно :)).
С этой точки отсчёта караулить необходимое время планировалось по нескольким параметрам:
1. Вагинальные мазки.
2. Определение уровня прогестерона с помощью индикатора «УРИГЛЮК» (полосочки для определения сахара в моче)
3. Хвост.
4. Остальные поведенческие характеристики.
5. Поведение окружающих кобелей.
Вагинальные мазки. Имевшееся у меня вооружение:
1. Детский микроскоп – 2 штуки. Один с диапазоном увеличения от 50 до 900, второй – от 400 до 1200. Оба без лампочек. Т.е. , они предусмотрены, но в одном не было батареек, во втором они сели через два дня, как мы приехали на дачу. Таким образом – только дневной свет, направляемый зеркалом.
2. Умный журнал с фотографиями, характерными для каждого периода течки.
3. Предметные стёкла (мне дали настоящие, из лаборатории, но в комплектах к детским микроскопам они есть, просто мои оба были не из новых)
4. Фукорцин из ближайшей аптеки для прокрашивания мазков
5. Пипетка для фукорцина (обычная, стеклянная, из аптеки, какой капли в нос).
6. Физраствор в ампулах (из обычной аптеки, тоже какие-то копеечные деньги).
7.
УРИГЛЮК – куплен в аптеке сети «Фармакор» за 84 руб.
Представляет из себя узкие полосочки непромокаемой бумаги с крошечным жёлтым индикатором на конце. Длина полосочки – 6 – 7 см.
Способ приготовления мазков.
Изначально я пользовалась всё теми же ватными палочками, которыми контролировала начало процесса. Погружаешь палочку «туда», не особо глубоко, и крутишь туда-сюда по стеночкам, типа, как ложкой сахар в стакане мешаешь. Потом извлекаешь и катаешь по предметному стеклу. Глазом хорошо видно, что остаётся видимый след. Затем быстро несколько раз проводишь нижней стороной стекла над огнём газовой плиты (фиксация). Свечкой лучше не пользоваться, можно просто закоптить. После того, как мазок зафиксирован, прокрашивала. Брала пипеткой пару капель фукорцина, капала в середину мазка, затем осторожно, кончиком этой же пипетки равномерно распределяла жидкость по всему мазку. Старалась использовать закон поверхностного натяжения и не касаться кончиком пипетки мазка. Затем ставила предметное стекло на ребро на салфетку, чтобы удалить излишки краски, и оставляла полежать для окончательного высыхания. После этого можно смотреть под микроскопом. Ну и помимо всего этого, я мазки не уничтожала, а подписывала карандашом для контура губ дату прямо на стекле рядом с мазком. С тем, что если какие сомнения меня и посетят, мы постфактум сможем посмотреть всё это дело в клинике со специалистами (что и было сделано потом).
В данной методике меня со временем перестало устраивать большое количество артефактов, которые давала ватная палочка. Т.е. – волокна ваты, например, на которые налипали клетки в мазке. Часть мазков я делала прямым способом, другую часть – капала сверху каплю физраствора. Картина распределения клеток по стеклу, соответственно, менялась. В конечном итоге, я стала делать мазки просто пальцем. Именно – просто погружаешь пальчик (желательно хорошо вымытый) на одну фалангу или чуток глубже, проходишь также по стеночкам, и дальше – сразу им мажешь по стеклу. Дальше так же – фиксация и прокрашивание. Мазки стали значительно более чистые и количество клеток более достоверно (вата всё же впитывает часть материала). Стоит, наверное, ещё раз упомянуть, что мазки лучше брать утром, до пописа и, главное, до того, как собака успела подлизнуть себя. Ежели успела, стоит подождать чуток. У меня было несколько раз, когда я лезу за «материалом», а там всё чисто и весьма сухо. Потом, в результате, на мазке больше моих отпечатков пальцев, чем клеток. Также стоит напомнить о том, что само предметное стекло должно быть чистым. На него надо подышать и тщательно протереть каким-нибудь маловолокнистым материалом.
Мой путь проб и ошибок был тяжёл и длителен. К концу, я пришла к выводу, что оптимальный мазок был бы, ежели я той же пипеткой забирала «оттуда» одну каплю материала, наносла на стекло, добавляла одну каплю физраствора, перемешивала путём пипеточного впуска-выпуска и, распределив по стеклу, зафиксировала и прокрасила. При таком методе было бы более или менее корректным сравнение количества клеток по дням. Основное, на чём основывалась бы эта достоверность, – это одинаковое количество материала и идентичное разведение в каждом мазке. Но я пришла к этому уже «постфактум», возможно, кто-то попробует? И ещё: если использовать ватную палочку, то, прежде, чем лезть за мазком, можно прежде её окунуть в физраствор. Тем самым уменьшится впитывание ватой самого материала и волокон на стекле будет меньше. После этого прокатить ватой по стеклу. Именно прокатить, а не размазывать. Чем тоньше слой клеток на стекле, тем лучше вы всё увидите. И уж совсем по науке – на каждом стёклышке с мазком нарисовать одинаковые квадратики и посчитать внутри него количество клеток вообще и безъядерных в частности
Сначала мазки можно брать через день, через два, ближе к середине периода переходить на ежедневные. У меня вообще микроскоп появился через несколько дней после начала течки, ещё пару дней я кувыркалась с мазками, и фотки у меня образовались только с 7-го дня от момента «первого пятнышка».
НО! Хоть с самого первого мазка я и испытывала разнообразные сомнения, типа «оно – не оно», когда реально наступает «оно» - это ни с чем не спутаешь! Каким бы способом взятия и приготовления мазка ни пользовался. Основное – пользоваться одним и тем же способом, чтобы сравнение мазков между собой было корректным.
Искомое – огромное количество ороговевших безъядерных клеток и практически полное отсутствие эритроцитов.
Использование УРИГЛЮКА.
Каким-то непостижимым образом выброс в кровь гормона прогестерона, предшествующего на несколько часов началу пика «охоты», коррелирует с увеличением уровня сахара во влагалищных выделениях. Я бы, наверное, могла вдаться в подробности, поднять пласты забытых знаний, чтобы установить эту взаимосвязь, но, во-первых, было некогда на тот момент, во-вторых, для моих прямых целей это было не нужно, в-третьих, начни я всё это здесь излагать, кому оно надо? Ведь для достижения искомого результата наличие или отсутствие данных знаний значения не имеет.
Уриглюк представляет собой маленький тубус с плотной крышкой, там - полосочки непромокаемой бумаги с маленьким индикатором на одном из кончиков полоски. На самом тубусе – цветовая шкала, по которой проводится сравнение.
Опять же, изначально пользовалась ватными палочками. Наносила ими материал на индикатор. Потом перешла на палец. Потом вообще погружала полоску индикатором прямо «туда» на глубину той же фаланги. Дело в том, что по инструкции это дело используется для определения сахара в моче. И рекомендуют погружать в мочу на 5 – 6 сек. Т.е. предполагается, что для достоверности результата, материал индикатора должен всё же пропитаться испытуемой жидкостью. А поскольку наша жидкость гуще мочи, то надо ждать уж никак не меньше этих секунд, а то и больше (7 – 8, например). И желательно обеспечить максимальное соприкосновение индикатора и материала, что достигается именно погружением «туда». Или же, если достаточно выделений на поверхности петли, то положить полосочку индикатором прямо в них, завалив собаку на спину. Результат смотрим в течение 2-х минут. Если оставить на час и более – этот результат будет одинаково тёмно-зелен во все дни :). Здесь у меня тоже были разнообразные варианты методик, но, главное, что к моменту пика я подошла, уже остановившись на методе «погружения» и чётких временных параметрах – 6-7 сек. «там» и через 2 минуты на воздухе – результат. Поэтому, здесь всё достоверно. Достаточно сказать, что несколько дней до пика полоски, которые я извлекала, были жёлтого цвета и только слегка зеленели через 2 минуты. В день пика я извлекла полоску «оттуда» УЖЕ хорошо зелёного цвета, а через 2 минуты она показывала практически максимум по цветовой шкале. Таким образом, определение данного параметра считаю достоверным :).
Полоски настолько тонкие и узкие, что собака их никак не ощущает вообще, особенно, если применяется анестезия в виде почёсывания пузика :)).
Таким образом, теперь понятно, откуда что бралось, и можно приступить к краткому и сжатому изложению хода всего процесса. Я буду описывать всё по дням, хронологически. С фотками мазков и индикаторных полосок. А так же с описанием поведенческих моментов. Всё в комплексе выглядит очень интересно и увлекательно :). И главное, – доступно к применению в любом уголке нашей необъятной страны :).
Итак, приступаем к описанию указанных параметров по дням.
Для начала. О том, что оно должно начаться, Белка сообщила недели за три. Прогулки перестали быть активными, а превратились в непрерывное чтение сообщений на каждом метре поверхности с зависанием на 10-15 минут у «досок объявлений» в виде углов, столбов и знаковых для кобелей кустиков. Через неделю активного чтения она приступила к нелёгкому писательскому труду. Т.е., проще говоря, стала метить.
Ближе к началу стала отказываться от еды без дополнительных кусочков, типа хлеб – сосиска, в миске с кормом. Но всё ж съедала всё и довольно быстро.
Я, конечно, понимала однозначно, к чему все эти телодвижения ведут, но сказать, за сколько точно дней до начала всё это проявляется в первый раз достаточно сложно. Тем более, эту течку Белка отодвинула на месяц.
После появления первой капли я ориентировалась только на размеры петли, видимые снаружи выделения и её собственное поведение (микроскопа и уриглюка у меня ещё не было).
Таким образом, 1 – 3 дни:
- петля не увеличена
- видимых выделений нет
- практически не вылизывается (крайне редко – 1 раз в день)
- встречные кобели интересуются (причём даже и не все), но быстро отвязываются
- читаем, пишем ответы – этакие «брачные объявления» (оставляем метки для кобелей, чтоб те знали – есть такая замечательная женщина, которой скоро они понадобятся для любовных утех), задумчива, появляется повышенная тревожность – пристально следит за тем, чтобы я не исчезала далеко.
- аппетит как обычно (но требуется доп.соблазн в миску, причём неоднократно. приходится стоять недалеко и периодически подбрасывать эти кусочки)
4 – 6 дни:
- петля не увеличена
- выделения видны на тампоне, который вставляется на время тренировки, внешне на петле не видно ничего
- особо не вылизывается
- кобели интересуются, но быстро отстают
- читаем, пишем ответы, задумчива, начинает истерить при моём исчезновении (уход на работу не в счёт)
- с едой так же
7 день (Чемпионат)
- петля слегка увеличена
- выделения так же
- начала периодически (но не часто) вылизываеться
- кобели не интересуются (хотя мы от них скрывались, но Ирин Гранд, будучи вплотную рядом, не отреагировал никак)
- появляется некоторая одержимость в плане почитать-написать (собака глохнет и слепнет в этот момент)
- меня не отпускает ни на шаг (привязанная к дереву в двух метрах от меня, рвёт поводок, чтобы быть со мной в непосредственном контакте, крича при этом очень громко).
- аппетит так же (требует непрерывный подброс соблазнов)
- мазок –
Демонстрирует наличие лейкоцитов (самые мелкие), эритроцитов (покрупнее, совсем тёмные) и небольшое количество ороговевших клеток с ядрами.
- прогестерон (условное название, на самом деле это уровень сахара) – незначительный уровень в начале цветовой шкалы.
8-ой день.
Уехали в отпуск на дачку.
Картина продолжает оставаться стабильной.
Петля достаточно увеличена, при разведении складок видны выделения.
Периодически лижется, но не очень часто.
Кобели интересуются, но быстро отстают.
Гуляем в лесу без поводка, прибегает по первому зову.
Аппетит стабильно средненький, приходится соблазнять вкусняшками в миску. Но съедает всё.
При прогулках в деревню живо интересуется встречными собаками (сказывается длительная изоляция от общества, ничего сексуального).
С большим вниманием читает ВСЁ.
Активно метит территорию, но именно этот процесс идёт как раз по нисходящей ( с каждым днём всё меньше).
Уриглюк показывает незначительную зелень
Клетки по-прежнему представляют смесь эритроцитов, лейкоцитов и ороговевших клеток.
и покрупнее -