Биохимическое исследование крови. Ферменты.
Ферменты – основные биологические катализаторы, т.е. вещества природного происхождения, ускоряющие химические реакции. Также, ферменты принимают участие в регуляции многих метаболических процессов, обеспечивая тем самым соответствие обмена веществ изменённым условиям. Почти все ферменты являются белками. В зависимости от реакционной и субстратной специфичности, различают шесть основных классов ферментов (оксиредуктазы, трансферазы, гидролазы, лиазы, изомеразы и лигазы). Всего, на настоящий момент, известно более 2000 ферментов.
Каталитическое действие фермента, т.е. его активность, определяют в стандартных условиях по увеличению скорости каталитической реакции по сравнению с некаталитической. Скорость реакции обычно указывают как изменение концентрации субстрата или продукта за единицу времени (ммоль/л в секунду). Другой единицей активности является Международная единица (Ед.) – количество фермента, превращающего 1 мкмоль субстрата в 1 минуту.
Для клиники основное значение имеют следующие ферменты:
Аспартатаминотрасфераза (АСТ, АсАТ)
Внутриклеточный фермент, участвующий в обмене аминокислот. В больших концентрациях содержится в печени, сердце, скелетной мускулатуре, мозге, эритроцитах. Высвобождается при повреждении ткани.
Референтные интервалы:
для собак – 11 – 42 Ед.;
для кошек – 9 – 29 Ед.
для лошадей – 130 – 300 Ед.
Повышено: Некроз клеток печени любой этиологии, острые и хронические гепатиты, некроз сердечной мышцы, некроз или травма скелетных мышц, жировая дистрофия печени, поражение тканей мозга, почек; применение антикоагулянтов, витамина С
Понижено: Диагностического значения не имеет (редко при недостатке пиридоксина (Витамина В6).
АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗА (АЛТ, АлАТ)
Внутриклеточный фермент, участвующий в обмене аминокислот. В больших концентрациях содержится в печени, почках, В мышцах – в сердце и скелетной мускулатуре. Высвобождается при повреждении ткани, особенно при поражении печени.
Референтные интервалы:
для собак – 9 – 52 Ед.;
для кошек – 19 – 79 Ед.
для лошадей – 2,7 – 20,0 ЕД;
Повышено: Некроз клеток, острые и хронические гепатиты, холангит, жировая дистрофия печени, опухоли печени, применение антикоагулянтов
Понижено: Диагностического значения не имеет
креатинфосфокиназа (КФК, КК)
КФК состоит из трёх изоферментов, состоящих из двух субъединиц, М и В. Скелетная мускулатура представлена изоферментом ММ (КФК-ММ), мозг – изоферментом ВВ (КФК-ВВ), миокард содержит около 40% изофермента МВ (КФК-МВ).
Референтные интервалы:
для собак – 32 – 157 Ед;
для кошек – 150 – 798 Ед.
для лошадей – 50 – 300 Ед.
у молодняка в период роста активность ЛДГ увеличивается в 2 – 3 раза.
Повышено: Инфаркт миокарда (2-24 ч; высокоспецифична КФК-МВ). Травмы, операции, миокардит, мышечные дистрофии, полимиозит, судороги, инфекции, эмболии, тяжелая физическая нагрузка, повреждение тканей мозга, кровоизлияние в мозг, наркоз, отравление (в т.ч. снотворными), кома, синдром Рейе. Незначительное увеличение при застойной сердечной недостаточности, тахикардии, артритах.
Понижено: Диагностического значения не имеет.
гамма-глутамилтрансфераза (ГГТ)
ГГТ присутствует в печени, почках, поджелудочной железе. Тест крайне чувствителен в отношении заболеваний печени. Установление высокого значения ГГТ используется для подтверждения печеночного происхождения активности сывороточной щелочной фосфатазы.
Референтные интервалы:
для собак – 1 – 10 Ед.;
для кошек – 1 – 10 Ед.
для лошадей – 1 – 20 Ед.
Повышено: Гепатит, холестаз, опухоли и цирроз печени, поджелудочной железы, постинфарктный период;
Понижено: Диагностического значения не имеет.
лактатдегидрогеназа (ЛДГ)
ЛДГ – фермент, катализирующий внутреннюю конверсию лактата и пирувата в присутствии НАД/НАДН. Широко распространен в клетках и жидких средах организма. Повышается при разрушении тканей (искусственно завышается при гемолизе эритроцитов при неправильном взятии и хранении крови). Представлен пятью изоферментами (ЛДГ1 – ЛДГ5)
Референтные интервалы:
для взрослых собак – 23 – 164 Ед.;
для взрослых кошек – 55 – 155 Ед.
для взрослых лошадей – 100 – 400 Ед.
у молодняка в период роста активность ЛДГ увеличивается в 2 – 3 раза.
Повышено: Повреждение ткани миокарда (2 – 7 сутки после развития инфаркта миокарда), лейкозы, некротические процессы, опухоли, гепатиты, панкреатиты, нефриты, мышечные дистрофии, повреждения скелетной мускулатуры, гемолитическая анемия, недостаточность кровообращения, лептоспироз, инфекционный перитонит кошек.
Понижено: Диагностического значения не имеет
Холинэстераза (ХЭ)
ХЭ содержится преимущественно в сыворотке крови, печени, поджелудочной железе. ХЭ плазмы крови - внеклеточный фермент гликопротеиновой природы, образующийся в клетках паренхимы печени.
Референтные интервалы:
собаки - от 2200 Е/л
кошки – от 2000 Е/л
Повышено: Диагностического значения не имеет.
Понижено: Подострые и хронические заболевания и поражения печени (в связи с нарушением синтеза ХЭ гепатоцитами), отравления фосфорорганическими соединениями.
АМИЛАЗА (ДИАСТАЗА)
Амилаза гидролизирует сложные углеводы. Альфа-амилаза сыворотки происходит первично из поджелудочной железы (панкреатическая) и слюнных желез, активность фермента возрастает при воспалении или обструкции. Некоторую амилазную активность имеют и другие органы – тонкий и толстый кишечник, скелетная мускулатура, яичники. У лошадей амилаза представлена, в основном, бета – фракцией.
Референтные интервалы:
для собак (альфа-амилаза) – 685 - 2155 Ед;
для кошек (альфа-амилаза) – 580 - 1720 Ед.
для лошадей (бета-амилаза) – 4,9 - 16,5 Ед.
Повышено: Панкреатит, паротит, почечная недостаточность (острая и хроническая), отравления, сахарный диабет, острый гепатит, первичный биллиарный цирроз печени, заворот желудка и кишечника, перитонит, нарушение электролитного обмена.
Понижено: Некроз поджелудочной железы, тиреотоксикоз, отравление мышьяком, барбитуратами, тетрахлорметаном; применение антикоагулянтов.
фосфатаза щелочная (ЩФ)
Щелочная фосфатаза содержится в печени, костях, кишечнике и плаценте. Для дифференциации активности ЩФ (печень или кости) используется определение ГГТ (увеличено при заболеваниях печени, и без изменений при заболеваниях костей).
Референтные интервалы:
для взрослых собак – 18 – 70 Ед;
для взрослых кошек – 39 – 55 Ед.
для взрослых лошадей – 70 – 250 Ед
у молодняка в период роста активность щелочной фосфатазы увеличивается в несколько раз и не является информативным показателем.
Повышено: Заживление переломов, остеомаляция, опухоли костей, холангит, синдром Кушинга, обтурация желчных протоков, опухоли желчного пузыря; абсцесс, цирроз, рак печени, гепатит, бактериальные инфекции ЖКТ, жирный корм, беременность.
Понижено: Гипотиреоз, анемия, гиповитаминоз С, применение кортикостероидов.
фосфатаза Кислая (кф)
У самцов 50% содержащейся в сыворотке КФ поступает из предстательной железы, а остальная часть – из печени и разрушающихся тромбоцитов и эритроцитов.
У самок КФ вырабатывается печенью, эритроцитами и тромбоцитами.
Референтные интервалы:
собаки- 1-6 Е/л
кошки – 1-6 Е/л
Повышено: Карцинома предстательной железы (в начальной стадии рака простаты активность КФ может быть в пределах нормы).
При метастазах карциномы предстательной железы в костную ткань нарастает и ЩФ.
Массаж предстательной железы, катетеризация, цистоскопия, ректальные исследования приводят к повышению КФ, поэтому кровь для анализа рекомендуется брать не ранее, чем через 48 часов после указанных процедур.
Понижено: Диагностического значения не имеет.
Липаза
Липаза – фермент, катализирующий расщепление глицеридов высших жирных кислот. В организме вырабатывается рядом органов и тканей, что позволяет различать липазу желудочного происхождения, поджелудочной железы, липазу легких, кишечного сока, лейкоцитов и др. Сывороточная липаза представляет собой сумму органных липаз, а повышение ее активности является следствием патологического процесса в каком-либо органе. Колебания активности сывороточной липазы у здорового животного незначительны.
Референтные интервалы:
собаки- 30-250 Е/л
кошки – 30-400 Е/л
Повышено: Острый панкреатит (может быть увеличение в 200 раз по сравнению с нормой) – активность липазы в крови быстро увеличивается в течение нескольких часов после приступа панкреатита, достигая максимума через 12-24 часов, и остается повышенной в течение 10-12 дней, т.е. более продолжительное время, чем активность α-амилазы. При злокачественном новообразовании поджелудочной железы в ранней стадии заболевания.
Понижено: Рак желудка (при отсутствии метастазов в печень и поджелудочную железу), при злокачественном новообразовании поджелудочной железы в более поздний период заболевания (по мере разрешения ткани железы).
Субстраты и жиры
Билирубин общий
Билирубин является продуктом метаболизма гемоглобина, конъюгируется в печени с глюкуроновой кислотой с образованием моно- и диглюкуронидов, выделяемых с желчью (прямой билирубин). Уровень билирубина в сыворотке увеличивается при заболеваниях печени, обструкции желчных путей или гемолизе. При гемолизе образуется неконъюгированный (непрямой) билирубин, следовательно, будет наблюдаться высокий общий билирубин при нормальном прямом.
Референтные интервалы:
для собак – 3,0 – 13,5 ммоль/л;
для кошек – 3,0 – 12,0 ммоль/л.
для лошадей – 5,4 – 51,4 ммоль/л.
Повышено: Повреждение клеток печени различного характера, обтурация желчных протоков, гемолиз
Понижено: Заболевания костного мозга, анемия, гипоплазия, фиброз
Билирубин прямой
Референтные интервалы:
для собак – 0,0 – 5,5 ммоль/л;
для кошек – 0,0 – 5,5 ммоль/л.
для лошадей – 0,0 – 10,0 ммоль/л.
Повышено: обтурация желчных протоков, холестаз, абсцесс печени, лептоспироз, хронический гепатит
Понижено: диагностического значения не имеет.
Мочевина
Мочевина образуется в печени в результате обезвреживания высокотоксичного аммиака, образуемого в результате бактериального брожения в желудочно-кишечном тракте, дезаминирования аминокислот, пуриновых и пиримидиновых оснований, биогенных аминов и проч. Выделяется почками.
Референтные интервалы:
для собак – 3,5 – 9,2 ммоль/л;
для кошек – 5,4 – 12,1 ммоль/л.
для лошадей – 3,5 – 8,8 ммоль/л;
Повышено: Нарушение функции почек (почечная недостаточность), богатое белком питание, острая гемолитическая анемия, шок, стресс, рвота, понос, острый инфаркт миокарда
Понижено: Низкое поступление белка в организм, тяжелые заболевания печени
Креатинин
Креатинин представляет собой конечный продукт метаболизма креатина, синтезируемого в почках и печени из трех аминокислот (аргинина, глицина, метионина). Креатинин полностью выделяется из организма почками путём клубочковой фильтрации, не реабсорбируясь в почечных канальцах. Это свойство креатинина используется для исследования уровня клубочковой фильтрации по клиренсу креатинина в моче и сыворотке крови.
Референтные интервалы:
для собак – 26,0 – 120,0 мкмоль/л;
для кошек – 70,0 – 165,0 мкмоль/л.
для лошадей – 80,0 – 180,0 мкмоль/л.
Повышено: Нарушение функции почек (почечная недостаточность), гипертиреоз, применение фуросемида, витамина С., глюкозы, индометацина, маннита. Пациенты с диабетическим кетоацидозом могут иметь ложно завышенный уровень креатинина.
Понижено: Беременность, возрастные уменьшения мышечной массы
Мочевая кислота
Мочевая кислота является конечным продуктом пуринового обмена. Она образуется в печени в результате распада нуклеотидов, дезаминирования аминопуринов и последующего окисления оксипуринов. Выводится из организма почками.
Референтные интервалы:
собаки- 9-100 мкмоль/л
кошки- до 150 мкмоль/л
Повышено: Значительно - при нарушении выведения мочевой кислоты из организма (заболевания почек, мочекаменная болезнь, ацидоз, токсикоз), подагра – обусловлена увеличением синтеза мочевой кислоты. Незначительно – при приеме корма богатого пуринами (мясо, печень, почки), некоторых гематологических заболеваниях (лейкозы, В12-дефицит. анемия), клеточном цитолизе, сахарном диабете.
Понижено: Диагностического значения не имеет.
Общий белок
Общий белок сыворотки состоит, главным образом, из альбуминов и глобулинов. Уровень глобулинов рассчитывается путём вычитания из общего уровня белка уровня альбумина. Гипопротеинемия указывает на гипоальбуминемию, т.к. альбумин является основным сывороточным белком. Концентрация белка сыворотки / плазмы определяется состоянием питания, функцией печени, почек, гидратацией и различными патологическими процессами. Концентрация белка определяет коллоидное осмотическое (онкотическое) давление.
Референтные интервалы:
для собак – 40,0 – 73,0 г/л;
для кошек – 54,0 – 77,0 г/л.
для лошадей – 47,0 – 75,0 г/л;
Повышено: Дегидратация, венозный стаз. Опухоли, воспалительные процессы, инфекции, гипериммуноглобулинемия
Понижено: Потери белка при гастроэнтеропатиях, нефротический синдром, снижение синтеза белка, хронические гепатиты, гепатозы, нарушение всасывания белка
Альбумин
Альбумины – наиболее гомогенная фракция простых белков, почти исключительно синтезирующихся в печени. Около 40% альбуминов находятся в плазме, остальные – в межклеточной жидкости. Основные функции альбуминов – поддержание онкотического давления, а также участие в транспорте мелких эндо- и экзогенных веществ (свободных жирных кислот, билирубина, стероидных гормонов, магния, кальция, лекарственных веществ, и проч.).
Референтные интервалы:
для собак – 22,0 – 39,0 г/л;
для кошек – 25,0 – 37,0 г/л.
для лошадей – 27,0 – 37,0 г/л.
Повышено: Состояние дегидратации;
Понижено: Дистрофия алиментарная, острые и хронические гепатиты, цирроз печени, заболевания ЖКТ, нефротический синдром, хронический пиелонефрит, синдром Кушинга, кахексия, тяжелые инфекции, панкреатит, экземы, экссудативные дерматопатии.
Глюкоза
Уровень глюкозы крови – основной показатель углеводного обмена. Поскольку глюкоза равномерно распределяется между плазмой и форменными элементами, её количество можно определять как в цельной крови, так и в сыворотке и плазме.
Референтные интервалы:
для собак – 4,3 – 7,3 ммоль/л;
для кошек – 3,3 – 6,3 ммоль/л.
для лошадей – 3,0 – 7,0 ммоль/л.
Повышено: сахарный диабет, синдром Кушинга, стресс, шок, инсульт, инфаркт миокарда, физическая нагрузка, хронические заболевания печени и почек, феохромацитома, глюкангиома, панкреатит, применение кортикостероидов, никотиновой кислоты, витамина С, диуретиков.
Понижено: Заболевания поджелудочной железы, рак желудка, фибросаркома, поражение паренхимы печени, инсулиновый шок
Холестерин
Уровень холестерина определяется метаболизмом жиров, который, в свою очередь зависит от наследственности, диеты, функции печени, почек, щитовидной железы и других эндокринных органов. Общий холестерин состоит из липопротеинов низкой и высокой плотности (ЛПНП и ЛПВП) и, приблизительно, пятой части триглицеридов.
Референтные интервалы:
для собак – 2,9 – 6,5 ммоль/л;
для кошек – 1.6 – 3,7 ммоль/л.
для лошадей – 2,3 – 3,6 ммоль/л.
Повышено: Гиперлипопротеинемия, заболевания печени, холестаз, хроническая почечная недостаточность, нефротический синдром, опухоли поджелудочной железы, ишемическая болезнь сердца, инфаркт миокарда, гипертоническая болезнь, сахарный диабет, применение кортикостероидов, сульфаниламидов, тиазидных диуретиков
Понижено: Дефицит ЛПВП, гипопротеинемия, опухоли и цирроз печени, гипертиреоз, острая и хроническая почечная недостаточность, печеночная недостаточность (терминальные стадии), ревматоидный артрит, недостаточность питания и всасывания, острые инфекции
триглицериды
Жиры корма гидролизуются в тонком кишечнике, абсорбируются и ресинтезируются клетками слизистой, после чего секретируются в лимфатические сосуды в виде хиломикронов. Триглицериды хиломикронов выводятся из крови тканевой липопротеинлипазой. В печени происходит эндогенная продукция триглицеридов. Эти триглицериды транспортируются в ассоциации с b-липопротеинами в составе липопротеинов очень низкой плотности (ЛПОНП).
Референтные интервалы:
для собак – 0,24 – 0,98 ммоль/л;
для кошек – 0,38 – 1,10 ммоль/л.
для лошадей – 0,1 – 0,4 ммоль/л.
Повышено: Гиперлипопротеинемия, сахарный диабет, гепатит, цирроз, обтурационная желтуха, острый и хронический панкреатит, нефротический синдром, хроническая почечная недостаточность, острый инфаркт миокарда, ишемическая болезнь сердца, беременность, стресс; прием кортикостероидов, эстрогенов, бета-блокаторов, диуретиков, диета с высоким содержанием жира, углеводов;
Понижено: Голодание, гипертиреоз, острые инфекции, хронические обструктивные заболевания легких, гипертиреоз; прием аскорбиновой кислоты, гепарина;
Электролиты
Калий (К)
Калий является основным внутриклеточным катионом, концентрация которого в сыворотке регулируется его выделением с мочой, и другими механизмами. Концентрация калия в сыворотке определяет нервно-мышечную возбудимость. Сниженный или повышенный уровень калия в крови влияет на мышечную сократимость
Референтные интервалы:
для собак – 4,3 – 6,2 ммоль/л;
для кошек – 4,1 – 5,4 ммоль/л
для лошадей – 2,2 – 4,5 ммоль/л
Повышено: Гемолиз, повреждение тканей, голодание, диабетический кетоацидоз, почечная недостаточность с анурией, олигурией, ацидозом, прием калий сберегающих диуретиков (спиронолактон, триамтерен), бета-блокаторов, ингибиторов АПФ, высоких доз сульфадиметоксина (Ко-тримоксазола).
Понижено: Голодание, рвота, понос, почечный канальцевый ацидоз, альдостеронизм, мышечная атрофия, применение фуросемида, стероидов, инсулина, глюкозы.
Натрий (Na)
Натрий – преобладающий внеклеточный катион. Уровень натрия, в первую очередь, определяется волемическим статусом организма.
Референтные интервалы:
для собак – 138 – 164 ммоль/л;
для кошек – 143 – 165 ммоль/л.
для лошадей – 130 – 143 ммоль/л.
Повышено: дегидратация, полиурия, сахарный и несахарный диабет, хронический гломерулонефрит, гипопаратиреоз, хроническая почечная недостаточность, опухоли костей, остеолиз, остеодистрофия, гипервитаминоз Д, прием фуросемида, тетрациклина, стероидных гормонов.
Понижено: Дефицит витамина Д, остеомаляция, мальадсорбция, гиперинсулинизм, прием анальгетиков, противосудорожных, инсулина. Ложная гипонатриемия может иметь место при тяжелой липемии или гиперпротеинемии, если анализ делается с разведением пробы.
Кальций общий (Са)
Кальций сыворотки является суммой ионов кальция, в т.ч. связанного с белками (в основном, с альбумином). Уровень ионов кальция регулируется паратиреоидным гормоном и витамином Д.
Референтные интервалы:
для собак – 2,3 – 3,3 ммоль/л;
для кошек – 2,0 – 2,7 ммоль/л.
для лошадей – 2,6 – 4,0 ммоль/л.
Повышено: Гиперпаратиреоз, опухоли костей, лимфома, лейкоз, саркоидоз, передозировка витамина Д
Понижено: Гипопаратиреоз, гиповитаминоз Д, хроническая почечная недостаточность, цирроз печени, панкреатит, остеомаляция, применение противосудорожных препаратов.
ФОСФОР (Р)
.Концентрация неорганических фосфатов в плазме крови определяется функцией паращитовидных желез, активностью витамина Д, процессом всасывания в ЖКТ, функцией почек, костным метаболизмом и питанием.
Оценивать показатель необходимо в комплексе с кальцием и щелочной фосфатазой.
Референтные интервалы:
для собак – 1,13 – 3,0 ммоль/л;
для кошек – 1,1 – 2,3 ммоль/л.
для лошадей – 0,7 – 1,9 ммоль/л.
Повышено: Почечная недостаточность, массивные гемотрансфузии, гипопаратиреоидизм, Гипервитаминоз Д, опухоли костей, лимфома, лейкоз, кетоз при сахарном диабете, заживающие переломы костей, применение диуретиков, анаболических стероидов.
Понижено: Гиперпаратиреоз, гиповитаминоз Д (рахит, остеомаляция), заболевания ЖКТ, нарушение питания, сильная диарея, рвота, струйное внутривенное введение глюкозы, инсулинотерапия, применение противосудорожных препаратов.
Железо (Fe)
Концентрация железа в сыворотке определяется его всасыванием в кишечнике; депонированием в кишечнике, печени, костном мозге; степенью распада или потерей гемоглобина; объемом биосинтеза гемоглобина.
Референтные интервалы:
для собак – 20,0 – 30,0 мкмоль/л;
для кошек – 20,0 – 30,0 мкмоль/л.
для лошадей – 13,0 – 23,0 мкмоль/л.
Повышено: гемосидероз, апластическая и гемолитическая анемия, острый (вирусный) гепатит, цирроз, жировая дистрофия печени, нефрит, отравление свинцом; приём эстрогенов.
Понижено: Железодефицитная анемия, нефротический синдром, злокачественные опухоли, инфекции, послеоперационный период.
Магний (Mg)
Магний, в первую очередь, является внутриклеточным катионом (60% содержится в костях); он является необходимым кофактором многочисленных ферментных систем, особенно АТФаз. Магний влияет на нервно-мышечный ответ и возбудимость. Концентрация магния во внеклеточной жидкости определяется его всасыванием из кишечника, выделением почками, и обменом с костями и внутриклеточной жидкостью.
Референтные интервалы:
для собак – 0,8 – 1,4 ммоль/л;
для кошек – 0,9 – 1,6 ммоль/л.
для лошадей – 0,6 – 1,5 ммоль/л.
Повышено: Дегидратация, почечная недостаточность, травма тканей, гипокортицизм; прием ацетилсалицилата (длительное), триамтерена, солей магния, прогестерона.
Понижено: Недостаток магния, тетания, острый панкреатит, беременность, понос, рвота, применение диуретиков, солей кальция, цитратов (при гемотрансфузии).
Хлор (Cl)
Хлор – важнейший неорганический анион внеклеточной жидкости, важен в поддержании нормального кислотно-щелочного равновесия и нормальной осмоляльности. При потере хлоридов (в виде HCl или NH4Cl) наступает алкалоз, при приёме внутрь или инъекции хлоридов возникает ацидоз.
Референтные интервалы:
для собак – 96,0 – 118,0 ммоль/л;
для кошек – 107,0 – 122,0 ммоль/л.
для лошадей – 94,0 – 106,0 ммоль/л.
Повышено: Гипогидратация, острая почечная недостаточность, несахарный диабет, почечный канальцевый ацидоз, метаболический ацидоз, респираторный алкалоз, гипофункция надпочечников, черепно-мозговые травмы, приём кортикостероидов, салицилатов (интоксикации).
Понижено: Алкалоз гипохлоремический, после пункций при асците, длительная рвота, понос, респираторный ацидоз, нефриты, прием слабительных, диуретиков, кортикостероидов (длительно).
Кислотность (pH)
Референтные интервалы:
для собак – 7,35 – 7,45 ;
для кошек – 7,35 – 7,45;
для лошадей – 7,35 – 7,45.
Повышено: Алкалоз (респираторный, нереспираторный)
Понижено: Ацидоз (респираторный, метаболический
